重組蛋白表達技術可用于多種下游應用,包括基因調控分析、蛋白結構及功能分析、蛋白質間相互作用分析等。對于特定的應用,使用正確的蛋白表達系統是實驗成功的重要因素。在選擇蛋白表達系統時,所需考慮的最重要因素是功能性、可溶性、速度及得率等。新啟迪生物依托深厚的醫學院資源背景、經驗豐富的科研人員和專業的蛋白表達、純化技術,可提供基于原核、酵母、昆蟲桿狀病毒、哺乳動物細胞等多種蛋白表達系統的微克至毫克級,高純度蛋白定制服務。
四種蛋白表達系統的優缺點:
蛋白表達系統 | 優點 | 缺點 |
原核表達系統 | 時間短 | 無翻譯后修飾 |
比較便宜 | 一些蛋白不能很好的折疊 | |
放大過程簡單 | 蛋白分泌量少 | |
很好的表征遺傳學 | ||
酵母表達系統 | 適度快速表達 | 需要使用酵母分泌信號肽 |
很好表達胞內蛋白和分泌蛋白 | 安全性還需提高 | |
比較便宜 | 具有與典型的哺乳動物蛋白不同的N-聯聚糖結構 | |
大部分蛋白都能進行折疊和翻譯后修飾 | ||
昆蟲桿狀病毒表達系統 | 適度快速表達 | 成本比較高 |
很好表達胞內蛋白、膜蛋白和分泌蛋白 | 難以放大 | |
大部分蛋白都能進行折疊和翻譯后修飾 | 具有與典型的哺乳動物蛋白不同的N-聯聚糖結構 | |
哺乳動物細胞表達系統 | 適度快速表達 | 成本比較高 |
很好表達膜蛋白和分泌蛋白 | 胞內蛋白產量低 | |
所有蛋白都能進行折疊和最真實的翻譯后修飾 | ||
哺乳動物細胞表達系統 | 很好表達膜蛋白和分泌蛋白 | 成本比較高 |
所有蛋白都能進行折疊和最真實的翻譯后修飾 | 周期長 | |
大腸桿菌蛋白表達系統是最常用也是最經濟實惠的蛋白表達系統。大腸桿菌蛋白表達系統主要有以下特點:遺傳背景清楚;易于培養和控制;轉化操作簡單;表達水平高;成本低;周期短。
新啟迪技術團隊有豐富的大腸桿菌系統蛋白表達經驗。針對于有些外源基因在大腸桿菌中重組表達會形成膜包裹的高密度、不溶性蛋白質的包涵體的情況,我們會進行表達系統優化,盡量降低形成包涵體的幾率。同時我們會通過評估確定最佳的復性條件,進行溫和的包涵體変復性。我們提供的復性蛋白純度在95%以上。
我們可以提供帶有不同標簽的特色融合蛋白的表達,對于客戶要求切除標簽的情況,我們可以做到切標簽不留殘基。我們具有特色的低溫誘導表達體系,大大提高了蛋白可溶表達幾率,增加了表達成功率和蛋白產物的活性概率。
項目成功率超過95%。
專業的蛋白表達技術團隊
一站式技術服務
密碼子優化:綜合考慮到基因合成、載體構建、基因轉錄、mRNA翻譯及修飾過程中的20多種因素。
大規模制備和發酵:我們擁有10L、100L的發酵設施,可在短時間內交付客戶大量高純度的目的蛋白。
密碼子優化
涉及基因合成、載體構建、基因保證轉錄、mRNA翻譯、翻譯后修飾等環節。
載體構建和目的基因亞克隆,新啟迪有多種原核表達載體如pET-24(+),pETBlue, pGEX-6P-1和多種大腸桿菌表達宿主如BL21, Origami DE3等供挑選。
表達菌株的篩選及蛋白的小量誘導檢測。
優化蛋白的表達方案并大量表達和純化蛋白。
擁有先進的純化系統和全套預裝的離子柱、分子篩、疏水柱及親和層析柱。
蛋白折疊、修飾、復性以及內毒素檢測和去除。
新啟迪提供多種蛋白的翻譯后修飾和檢測和蛋白質復性服務。
蛋白鑒定。
利用定性或者定量分析的方法進行蛋白質鑒定。
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